摘要：目的 建立氣相色譜頂空進(jìn)樣法檢測(cè)氟胞嘧啶中的殘留溶劑1，2二氯苯和N,N二甲基苯胺 方法 頂空進(jìn)樣瓶體積20ml，進(jìn)樣量6ul，樣品定量環(huán)體積1ml，平衡溫度90℃，定量環(huán)溫度100℃，傳輸線溫度110℃，平衡時(shí)間10min，檢測(cè)周期25min。結(jié)果1，2二氯苯和N,N二甲基苯胺的分離度為9.41;1，2-二氯苯峰面積的重復(fù)性為RSD=0.87%，N,N二甲基苯胺的峰面積重復(fù)性為RSD=1.66%;1，2-二氯苯峰面積的中間精密度RSD=0.28%，N，N-二甲基苯胺峰面積中間精密度RSD=1.53%;1，2二氯苯的線性關(guān)系為y=13.347x-0.2557 r=0.9997，N,N二甲基苯胺的線性關(guān)系y=20.221x-0.0335 r=0.9998;1，2二氯苯的回收率為100.54%-101.15%，N,N二甲基苯胺的回收率為99.86%-100.60%; 1，2-二氯苯的檢測(cè)限為0.05909ug/ml，N，N-二甲基苯胺的檢測(cè)限為0.03105ug/ml;1，2-二氯苯的定量限為0.2056ug/ml，N，N-二甲基苯胺的定量限為0.1548ug/ml;方法具備一定耐用性。結(jié)論 本方法分離度良好，準(zhǔn)確度高，有很好的線性、檢測(cè)限和定量限。

關(guān)鍵詞 頂空進(jìn)樣法 氟胞嘧啶 殘留溶劑

氟胞嘧啶化學(xué)名為4-氨基-5-氟-2(1H)-嘧啶酮，是一種抗真菌藥，用于治療白念球菌和隱球菌等感染。根據(jù)我公司氟胞嘧啶的工藝，產(chǎn)品氟胞嘧啶中的主要?dú)埩羧軇┦?，2-二氯苯和N，N-二甲基苯胺，1，2-二氯苯的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)為50 ppm, N，N-二甲基苯胺的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)為5ppm,對(duì)殘留溶劑1，2-二氯苯和N，N-二甲基苯胺的測(cè)試，現(xiàn)采用氣相色譜頂空進(jìn)樣方法，有效地控制產(chǎn)品中的這兩種殘留溶劑，達(dá)到了滿意的效果。

1 儀器與試藥

安捷倫7890A氣相色譜儀 G1888頂空進(jìn)樣器 安捷倫Chemstation 色譜軟件DB-624(30m×0.53mm×3.0um)石英毛細(xì)管柱及氫火焰離子化檢測(cè)器 氟胞嘧啶工作標(biāo)準(zhǔn)品(FLC2010001S，本公司自制)1，2-二氯苯、N，N-二甲基苯胺和乙醇為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1【1】 色譜條件

氮?dú)庾鬏d氣，柱流速4ml/min，進(jìn)樣器溫度160℃，柱溫150℃，檢測(cè)器溫度280℃，分流比：20：1，空氣流速380ml/min，氫氣流速30ml/min，尾吹+恒定柱流50ml/min。頂空進(jìn)樣瓶體積20ml，進(jìn)樣量6ul，樣品定量環(huán)體積1ml，平衡溫度90℃，定量環(huán)溫度100℃，傳輸線溫度110℃，平衡時(shí)間10min，加壓時(shí)間0.08min，定量環(huán)填充時(shí)間0.05min，定量環(huán)平衡時(shí)間0.05min，進(jìn)梯時(shí)間1.00min，檢測(cè)周期25min。

2.2【1】樣品和對(duì)照制備

2.2.1對(duì)照品溶液的制備(a)精確稱取1，2-二氯苯0.0587克加入內(nèi)有少量無(wú)水乙醇的100ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇定容，即得標(biāo)準(zhǔn)貯備液(a)。

(b)精確稱取N，N-二甲基苯胺0.0619克加入內(nèi)有少量無(wú)水乙醇的100ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇定容，精確吸取該溶液1.00ml于10ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇定容，即得標(biāo)準(zhǔn)貯備液(b)。

分別精確吸取標(biāo)準(zhǔn)貯備液(a)和標(biāo)準(zhǔn)貯備液(b)各1ml于100ml容量瓶中，定容，即得標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照液。此標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照液相當(dāng)于樣品中1，2-二氯苯的濃度50ppm左右，N.N-二甲基苯胺的濃度5ppm左右。

2.2.2 樣品溶液的制備 精確稱取氟胞嘧啶樣品1.0克，于10ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇溶解后定容。

2.3【2】 重復(fù)性

分別連續(xù)精確吸取(a)和(b)各1ml于10ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇定容得標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液，吸取6ul分別進(jìn)樣。六次測(cè)定的1，2-二氯苯的峰面積RSD=0.87%;N，N-二甲基苯胺的峰面積RSD=1.66%。

2.4【2】分離度

由重復(fù)性中任一張色譜圖計(jì)算出1，2二氯苯和N,N二甲基苯胺的分離度為9.41。

2.5【2】中間精密度

將2.3中的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液放置2天后，由不同的檢驗(yàn)人員吸取6ul分別進(jìn)樣。六次測(cè)定的1，2-二氯苯的峰面積RSD=0.28%;N，N-二甲基苯胺的峰面積RSD=1.53%。

2.6【2】線性

用標(biāo)準(zhǔn)貯備液(a)配制七種濃度的1，2-二氯苯測(cè)定其線性，得回歸方程：y=13.347x-0.2557 ，相關(guān)系數(shù)(r):r=0.99997。用標(biāo)準(zhǔn)貯備液(b)配制七種濃度的N，N-二甲基苯胺測(cè)定其線性，得回歸方程：y=20.221x-0.0335 相關(guān)系數(shù)(r):r=0.99963。

2.7【2】準(zhǔn)確度(回收率)

準(zhǔn)確稱氟胞嘧啶工作標(biāo)準(zhǔn)品1.0g于10ml容量瓶中(三份)，然后分別加入2.2.1溶液(a)和溶液(b)0.7ml，1.0ml，1.3ml，配成三種濃度的樣品。每個(gè)濃度連續(xù)進(jìn)樣三針，進(jìn)樣量為6ul。計(jì)算1，2-二氯苯各濃度的回收率分別是99.97%、100.52%、100.90%，RSD分別是0.04%、0.02%、0.24%;N，N二甲基苯胺的各濃度的回收率分別是99.13%、101.15%、99.44%，RSD分別是2.26%、0.54%、0.93%。

2.8【2】檢測(cè)限 定量限

在選定的色譜條件下，以信噪為在3：1為最低檢測(cè)限進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明濃度為0.0587ug/ml的1，2-二氯苯溶液，濃度為0.03095ug/ml的N，N-二甲基苯胺溶液，進(jìn)樣量為6 ul時(shí)產(chǎn)生的主峰信號(hào)約為噪音的3倍;以信噪為在10：1為定量限進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明濃度為0.2054ug/ml的1，2-二氯苯溶液，濃度為0.1548ug/ml的N，N-二甲基苯胺溶液，進(jìn)樣量為6 ul時(shí)產(chǎn)生的主峰信號(hào)約為噪音的10倍。

2.9【2】方法耐用性

分別測(cè)定2.3中的1，2-二氯苯和N,N-二甲基苯胺標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液放置0、1、2、4、6、8、24、48小時(shí)后其峰面積RSD=0.61% 和RSD=1.62%;分別使用南京化學(xué)試劑有限公司和上�；瘜W(xué)試劑有限公司的無(wú)水乙醇配制對(duì)照液進(jìn)行測(cè)定，使用DB-624(30m×0.53mm×3.0um) NO:us5342227H和DB-624(30m×0.53mm×3.0um) NO:us7120822H兩個(gè)批號(hào)的色譜柱，測(cè)定結(jié)果均未有差異;分別設(shè)定柱溫溫度148℃、150℃、152℃，柱流速為3.8ml/min、4.0 ml/min、4.2 ml/min，平衡溫度為85℃、90℃、95℃，平衡時(shí)間為8min、10 ml/min、12 ml/min，測(cè)定1，2-二氯苯和N,N-二甲基苯胺標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照溶液，其結(jié)果都表明無(wú)較明顯變化。

2.10【2】樣品測(cè)試

分別稱取FLC2009034、FLC2009035、FLC2009036三個(gè)批號(hào)的樣品1.0g于10ml容量瓶中，用無(wú)水乙醇定容，將2.2.1的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照液和三批樣品進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果顯示該三批樣品中的1，2-二氯苯和N,N-二甲基苯胺均未檢出。

3 討論

本方法溶劑出峰與兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)峰能較好分離，空白溶劑不干擾測(cè)試;本方法靈敏度高、重現(xiàn)性好、分離效果好，具有很好的線性、準(zhǔn)確性和耐用性，本方法能有效準(zhǔn)確地控制氟胞嘧啶產(chǎn)品中1，2-二氯苯和N,N-二甲基苯胺兩種溶劑殘留，是一個(gè)實(shí)用可靠的檢測(cè)方法。

參考文獻(xiàn)

【1】2011年1月歐洲藥品質(zhì)量委員會(huì)出版的Ph.Eur.7.0藥典第123-127頁(yè)，2011年1月美國(guó)藥典委員會(huì)出版的USP34藥典第171-182頁(yè)。

【2】 2005年人用藥物注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)發(fā)布的ICHQ2指南和2010年中國(guó)醫(yī)藥科技出版社出版的中國(guó)藥典2010版二部附錄194-195頁(yè)。

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