食品安全是一個全球性的話題，全球食品行業(yè)每年有5000億的產(chǎn)值，保障食品質(zhì)量與安全需要所有相關(guān)行業(yè)的共同努力。近年來隨著環(huán)境污染的加劇和生態(tài)平衡的不斷破壞，可導(dǎo)致人類感染的致病菌的種類越來越多，微生物對人類的威脅越來越大。隨著人們對食品安全的關(guān)注越來越高，與其相關(guān)的理念與技術(shù)也不斷升級。傳統(tǒng)的微生物檢驗(yàn)方法，主要包括形態(tài)檢查和生化方法，其準(zhǔn)確性、靈敏性均較高，但涉及的實(shí)驗(yàn)較多、操作煩瑣、需要時間較長、準(zhǔn)備和收尾工作繁重，而且要有大量人員參與[1，2]。繁瑣的檢測程序不僅占用了大量的檢測資源，更重要的是冗長的檢測周期既不利于生產(chǎn)者對食品的在線控制，也不利于監(jiān)管部門對問題食品的快速反應(yīng)，因此運(yùn)用食品微生物快速檢測技術(shù)，對防止食源性疾病的危害以及對企業(yè)的發(fā)展具有重要意義[3]。

　　摘要：傳統(tǒng)的微生物檢測方法由于存在檢測周期長、程序復(fù)雜等缺點(diǎn)，已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足現(xiàn)代檢測的需求。Soleris微生物實(shí)時光電快速檢測系統(tǒng)（以下簡稱Soleris系統(tǒng)）是基于傳統(tǒng)的培養(yǎng)基理論和染色技術(shù)準(zhǔn)確檢測微生物常規(guī)指標(biāo)的新技術(shù)，能夠有效縮短檢測時間、提高檢測效率，提前預(yù)警。完美（中國）有限公司通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證Soleris方法對常規(guī)微生物在既定時間內(nèi)進(jìn)行檢測的準(zhǔn)確性，應(yīng)用Soleris系統(tǒng)對本公司保健食品進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，結(jié)果證實(shí)Soleris系統(tǒng)用于保健食品檢測的報警時間可控制在30小時以內(nèi)，完整的檢測報告輸出可控制在48小時以內(nèi)，并且檢測結(jié)果的準(zhǔn)確率≥97%。

　　關(guān)鍵詞：Soleris快速檢測系統(tǒng),微生物檢測,陽性試驗(yàn),準(zhǔn)確率

　　本實(shí)驗(yàn)主要應(yīng)用Soleris微生物實(shí)時光電快速檢測系統(tǒng)對完美（中國）有限公司自產(chǎn)保健食品中霉菌酵母菌進(jìn)行檢測，以判定該系統(tǒng)應(yīng)用于保健食品的及時性和準(zhǔn)確性。Soleris系統(tǒng)原理是基于傳統(tǒng)的培養(yǎng)基理論和染色技術(shù)，結(jié)合了光電檢測技術(shù)和計算機(jī)控制的模塊化分析系統(tǒng)，對產(chǎn)品中的微生物進(jìn)行檢測。在預(yù)制的Soleris試劑瓶中放置特異性的培養(yǎng)基和專用指示劑，當(dāng)微生物在培養(yǎng)瓶中生長時，會發(fā)生代謝產(chǎn)物改變培養(yǎng)基pH值或釋放CO2等生化反應(yīng)，從而引起指示劑的顏色變化。Soleris系統(tǒng)利用光電檢測儀器，每隔6分鐘監(jiān)測試劑瓶底部瓊脂栓的顏色變化，Soleris軟件將監(jiān)測到的數(shù)據(jù)收集并傳輸?shù)接嬎銠C(jī)中進(jìn)行分析統(tǒng)計，然后即可得到準(zhǔn)確的檢測結(jié)果[4]。

　　1實(shí)驗(yàn)部分

　　1.1儀器與試劑

　　Soleris微生物實(shí)時光電快速檢測系統(tǒng)，高壓滅菌鍋，生化培養(yǎng)箱，超凈工作臺，冰箱，水浴鍋，天平，微量移液槍，DYM-109試劑瓶，YI-110（補(bǔ)充液）。

　　檢測保健食品：膠囊產(chǎn)品健揚(yáng)膠囊（英文縮寫JYC）、粉劑產(chǎn)品肽藻營養(yǎng)粉（英文縮寫PSN）、口服液產(chǎn)品活立多（英文縮寫OLI）（以上均為完美（中國）有限公司所產(chǎn)保健食品）。

　　1.2樣液制備

　　1.2.1菌液制備

　　菌種來源：黑曲霉ATCC16404、白假絲酵母菌ATCC10231以及完美高纖樂產(chǎn)品中分離出的霉菌�；旌暇�液：酵母菌菌種斜面培養(yǎng)物和霉菌菌種斜面培養(yǎng)物2～8℃保存（第二代）。從斜面培養(yǎng)物中傳代至PDA斜面上，28℃培養(yǎng)3天，作為工作菌株使用。首先用接種環(huán)在新鮮接種培養(yǎng)的酵母菌斜面上挑取兩環(huán)酵母菌至90mL無菌水中，混合均勻。然后再用10mL無菌水洗脫一支新鮮接種培養(yǎng)的霉菌斜面，用接種環(huán)輕輕來回擦拭霉菌斜面，將孢子洗脫下來。用移液管吸取5mL孢子洗脫液沿瓶壁緩慢注入上述90mL無菌水中，混合均勻，得到霉菌酵母菌的混合菌液。此菌液100記為原液C0。用移液管吸取上述混合菌液10mL至90mL無菌水中，震搖使其混合均勻，此菌液10-1記為C1。依次按此操作程序，制備10倍系列稀釋菌液。每遞增稀釋一次，換用一支移液管。菌液記為C0，C1，C2，…C7，C8。

　　1.2.2樣品液制備

　　稱取10g樣品至80mL無菌水中，共計稱取7組，分別記為樣①，樣②，…，樣⑦。然后分別向樣品液中接種10mL上述已制備的菌液，即加10mLC2菌液至樣①中，加10mLC3菌液至樣②中，…，加10mLC8菌液至樣⑦中，含不同濃度霉菌酵母菌的1∶10的陽性樣品液制備完成。

　　1.3檢測流程

　　加入150μLYI-110（補(bǔ)充液）于DYM-109檢測試劑瓶中，將配置好的樣①～⑦加入到DYM-109檢測試劑瓶中，擰緊蓋子輕輕振搖使待檢樣品與試劑瓶內(nèi)液體混合均勻。將試劑瓶置于Soleris快速檢測系統(tǒng)培養(yǎng)，錄入樣品檢測信息開始檢測，28℃，培養(yǎng)48h，讀取檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計（包括假陽性率*、假陰性率*、準(zhǔn)確性*、特異性*、靈敏度*）。同時對樣①～樣⑦采用國標(biāo)方法（GB/T4789.15-2003）檢測霉菌、酵母菌。

　　2結(jié)果與討論

　　2.1蘆薈礦物晶Soleris快速方法驗(yàn)收結(jié)果（與基準(zhǔn)方法國標(biāo)方法相比），見表1、圖1。

　　GB法檢測結(jié)果

　　2.2肽藻營養(yǎng)粉Soleris快速方法驗(yàn)收結(jié)果（與基準(zhǔn)方法國標(biāo)方法相比），見表3、表4、圖2。

　　2.3活力多Soleris快速方法驗(yàn)收結(jié)果（與基準(zhǔn)方法國標(biāo)方法相比），見表5、表6、圖3。

　　準(zhǔn)確性即指參考方法（GB平板法）與替代方法（Soleris快速法）對于指定樣品所得到的檢測結(jié)果的一致性。特異性即指當(dāng)參考方法沒有檢測到目標(biāo)分析物時，替代方法相對于參考方法也不會檢測到目標(biāo)分析物的能力，即評估該方法的假陽性率。靈敏性即指當(dāng)參考方法檢測到目標(biāo)分析物時，替代方法也檢測到目標(biāo)分析物的能力，即評估該方法的假陰性率。

　　由圖1可見，Soleris快速法檢測健揚(yáng)膠囊產(chǎn)品的曲線中Soleris快速檢出時間與含菌量存在較好的負(fù)相關(guān)的關(guān)系，即含菌量越多，檢出時間越早。當(dāng)產(chǎn)品中含菌量大于標(biāo)準(zhǔn)25CFU/g時，系統(tǒng)在22h左右報警。由圖2可見，Soleris快速法檢測肽藻營養(yǎng)粉產(chǎn)品的曲線中Soleris快速檢出的曲線跟陽性曲線一致，且檢出時間與含菌量存在較好的負(fù)相關(guān)的關(guān)系，即含菌量越多，檢出時間越早。對肽藻營養(yǎng)粉而言，當(dāng)產(chǎn)品中含菌量大于標(biāo)準(zhǔn)25CFU/g時，系統(tǒng)在20h左右報警。由圖3可見，Soleris快速法檢測活力多產(chǎn)品的曲線中Soleris快速檢出的曲線跟陽性曲線一致，同樣其檢出時間與含菌量存在較好的負(fù)相關(guān)的關(guān)系，即含菌量越多，檢出時間越早。對活力多而言，當(dāng)產(chǎn)品中含菌量大于標(biāo)準(zhǔn)25CFU/g時，系統(tǒng)在20h左右報警�？焖贆z測及其自動化綜合引用微生物學(xué)、化學(xué)、分子生物學(xué)等試驗(yàn)技術(shù)對微生物進(jìn)行分離、檢測。和傳統(tǒng)方法比較，更快、更方便、更靈敏，可以同時得到定量的檢測結(jié)果。因此Soleris系統(tǒng)既可以適應(yīng)國內(nèi)食品檢測的特定要求，又能為企業(yè)的快速放貨提供信心保證[5]。完美公司遵從質(zhì)量第一原則從滿足消費(fèi)者對食品安全與生命健康的迫切要求出發(fā)，將新型檢測技術(shù)與傳統(tǒng)檢測相結(jié)合，給予產(chǎn)品質(zhì)量雙重保障，對存在微生物風(fēng)險的產(chǎn)品能夠在30h內(nèi)發(fā)出警報，縮短了分析不合格的原因，減少了不合格品的產(chǎn)生，提高了過程監(jiān)控反應(yīng)速度，利于產(chǎn)品的質(zhì)量控制與生產(chǎn)控制，既是對自己嚴(yán)格要求，也是對消費(fèi)者負(fù)責(zé)任的體現(xiàn)。

　　參考文獻(xiàn)

　　[1]唐靈，郭奕芳，吳翊等.Petrifilm紙片法和國際法檢測奶制品細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)的結(jié)果比較[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2000，10（3）：325-327.

　　[2]吳清平，周艷紅，蔡芷荷.衛(wèi)生微生物特異性顯色培養(yǎng)基的研究與應(yīng)用[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2005，15（1）：124-126.

　　[3]熊強(qiáng)，史純珍，劉釗.食品微生物快速檢測技術(shù)研究進(jìn)展.食品與械[J].2009，9（25）

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