食品安全是一個(gè)全球性的話(huà)題，全球食品行業(yè)每年有5000億的產(chǎn)值，保障食品質(zhì)量與安全需要所有相關(guān)行業(yè)的共同努力。近年來(lái)隨著環(huán)境污染的加劇和生態(tài)平衡的不斷破壞，可導(dǎo)致人類(lèi)感染的致病菌的種類(lèi)越來(lái)越多，微生物對(duì)人類(lèi)的威脅越來(lái)越大。隨著人們對(duì)食品安全的關(guān)注越來(lái)越高，與其相關(guān)的理念與技術(shù)也不斷升級(jí)。傳統(tǒng)的微生物檢驗(yàn)方法，主要包括形態(tài)檢查和生化方法，其準(zhǔn)確性、靈敏性均較高，但涉及的實(shí)驗(yàn)較多、操作煩瑣、需要時(shí)間較長(zhǎng)、準(zhǔn)備和收尾工作繁重，而且要有大量人員參與[1，2]。繁瑣的檢測(cè)程序不僅占用了大量的檢測(cè)資源，更重要的是冗長(zhǎng)的檢測(cè)周期既不利于生產(chǎn)者對(duì)食品的在線控制，也不利于監(jiān)管部門(mén)對(duì)問(wèn)題食品的快速反應(yīng)，因此運(yùn)用食品微生物快速檢測(cè)技術(shù)，對(duì)防止食源性疾病的危害以及對(duì)企業(yè)的發(fā)展具有重要意義[3]。

　　摘要：傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法由于存在檢測(cè)周期長(zhǎng)、程序復(fù)雜等缺點(diǎn)，已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足現(xiàn)代檢測(cè)的需求。Soleris微生物實(shí)時(shí)光電快速檢測(cè)系統(tǒng)（以下簡(jiǎn)稱(chēng)Soleris系統(tǒng)）是基于傳統(tǒng)的培養(yǎng)基理論和染色技術(shù)準(zhǔn)確檢測(cè)微生物常規(guī)指標(biāo)的新技術(shù)，能夠有效縮短檢測(cè)時(shí)間、提高檢測(cè)效率，提前預(yù)警。完美（中國(guó)）有限公司通過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證Soleris方法對(duì)常規(guī)微生物在既定時(shí)間內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的準(zhǔn)確性，應(yīng)用Soleris系統(tǒng)對(duì)本公司保健食品進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，結(jié)果證實(shí)Soleris系統(tǒng)用于保健食品檢測(cè)的報(bào)警時(shí)間可控制在30小時(shí)以?xún)?nèi)，完整的檢測(cè)報(bào)告輸出可控制在48小時(shí)以?xún)?nèi)，并且檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率≥97%。

　　關(guān)鍵詞：Soleris快速檢測(cè)系統(tǒng),微生物檢測(cè),陽(yáng)性試驗(yàn),準(zhǔn)確率

　　本實(shí)驗(yàn)主要應(yīng)用Soleris微生物實(shí)時(shí)光電快速檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)完美（中國(guó)）有限公司自產(chǎn)保健食品中霉菌酵母菌進(jìn)行檢測(cè)，以判定該系統(tǒng)應(yīng)用于保健食品的及時(shí)性和準(zhǔn)確性。Soleris系統(tǒng)原理是基于傳統(tǒng)的培養(yǎng)基理論和染色技術(shù)，結(jié)合了光電檢測(cè)技術(shù)和計(jì)算機(jī)控制的模塊化分析系統(tǒng)，對(duì)產(chǎn)品中的微生物進(jìn)行檢測(cè)。在預(yù)制的Soleris試劑瓶中放置特異性的培養(yǎng)基和專(zhuān)用指示劑，當(dāng)微生物在培養(yǎng)瓶中生長(zhǎng)時(shí)，會(huì)發(fā)生代謝產(chǎn)物改變培養(yǎng)基pH值或釋放CO2等生化反應(yīng)，從而引起指示劑的顏色變化。Soleris系統(tǒng)利用光電檢測(cè)儀器，每隔6分鐘監(jiān)測(cè)試劑瓶底部瓊脂栓的顏色變化，Soleris軟件將監(jiān)測(cè)到的數(shù)據(jù)收集并傳輸?shù)接?jì)算機(jī)中進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì)，然后即可得到準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果[4]。

　　1實(shí)驗(yàn)部分

　　1.1儀器與試劑

　　Soleris微生物實(shí)時(shí)光電快速檢測(cè)系統(tǒng)，高壓滅菌鍋，生化培養(yǎng)箱，超凈工作臺(tái)，冰箱，水浴鍋，天平，微量移液槍?zhuān)珼YM-109試劑瓶，YI-110（補(bǔ)充液）。

　　檢測(cè)保健食品：膠囊產(chǎn)品健揚(yáng)膠囊（英文縮寫(xiě)JYC）、粉劑產(chǎn)品肽藻營(yíng)養(yǎng)粉（英文縮寫(xiě)PSN）、口服液產(chǎn)品活立多（英文縮寫(xiě)OLI）（以上均為完美（中國(guó)）有限公司所產(chǎn)保健食品）。

　　1.2樣液制備

　　1.2.1菌液制備

　　菌種來(lái)源：黑曲霉ATCC16404、白假絲酵母菌ATCC10231以及完美高纖樂(lè)產(chǎn)品中分離出的霉菌。混合菌液：酵母菌菌種斜面培養(yǎng)物和霉菌菌種斜面培養(yǎng)物2～8℃保存（第二代）。從斜面培養(yǎng)物中傳代至PDA斜面上，28℃培養(yǎng)3天，作為工作菌株使用。首先用接種環(huán)在新鮮接種培養(yǎng)的酵母菌斜面上挑取兩環(huán)酵母菌至90mL無(wú)菌水中，混合均勻。然后再用10mL無(wú)菌水洗脫一支新鮮接種培養(yǎng)的霉菌斜面，用接種環(huán)輕輕來(lái)回擦拭霉菌斜面，將孢子洗脫下來(lái)。用移液管吸取5mL孢子洗脫液沿瓶壁緩慢注入上述90mL無(wú)菌水中，混合均勻，得到霉菌酵母菌的混合菌液。此菌液100記為原液C0。用移液管吸取上述混合菌液10mL至90mL無(wú)菌水中，震搖使其混合均勻，此菌液10-1記為C1。依次按此操作程序，制備10倍系列稀釋菌液。每遞增稀釋一次，換用一支移液管。菌液記為C0，C1，C2，…C7，C8。

　　1.2.2樣品液制備

　　稱(chēng)取10g樣品至80mL無(wú)菌水中，共計(jì)稱(chēng)取7組，分別記為樣①，樣②，…，樣⑦。然后分別向樣品液中接種10mL上述已制備的菌液，即加10mLC2菌液至樣①中，加10mLC3菌液至樣②中，…，加10mLC8菌液至樣⑦中，含不同濃度霉菌酵母菌的1∶10的陽(yáng)性樣品液制備完成。

　　1.3檢測(cè)流程

　　加入150μLYI-110（補(bǔ)充液）于DYM-109檢測(cè)試劑瓶中，將配置好的樣①～⑦加入到DYM-109檢測(cè)試劑瓶中，擰緊蓋子輕輕振搖使待檢樣品與試劑瓶?jī)?nèi)液體混合均勻。將試劑瓶置于Soleris快速檢測(cè)系統(tǒng)培養(yǎng)，錄入樣品檢測(cè)信息開(kāi)始檢測(cè)，28℃，培養(yǎng)48h，讀取檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)（包括假陽(yáng)性率*、假陰性率*、準(zhǔn)確性*、特異性*、靈敏度*）。同時(shí)對(duì)樣①～樣⑦采用國(guó)標(biāo)方法（GB/T4789.15-2003）檢測(cè)霉菌、酵母菌。

　　2結(jié)果與討論

　　2.1蘆薈礦物晶Soleris快速方法驗(yàn)收結(jié)果（與基準(zhǔn)方法國(guó)標(biāo)方法相比），見(jiàn)表1、圖1。

　　GB法檢測(cè)結(jié)果

　　2.2肽藻營(yíng)養(yǎng)粉Soleris快速方法驗(yàn)收結(jié)果（與基準(zhǔn)方法國(guó)標(biāo)方法相比），見(jiàn)表3、表4、圖2。

　　2.3活力多Soleris快速方法驗(yàn)收結(jié)果（與基準(zhǔn)方法國(guó)標(biāo)方法相比），見(jiàn)表5、表6、圖3。

　　準(zhǔn)確性即指參考方法（GB平板法）與替代方法（Soleris快速法）對(duì)于指定樣品所得到的檢測(cè)結(jié)果的一致性。特異性即指當(dāng)參考方法沒(méi)有檢測(cè)到目標(biāo)分析物時(shí)，替代方法相對(duì)于參考方法也不會(huì)檢測(cè)到目標(biāo)分析物的能力，即評(píng)估該方法的假陽(yáng)性率。靈敏性即指當(dāng)參考方法檢測(cè)到目標(biāo)分析物時(shí)，替代方法也檢測(cè)到目標(biāo)分析物的能力，即評(píng)估該方法的假陰性率。

　　由圖1可見(jiàn)，Soleris快速法檢測(cè)健揚(yáng)膠囊產(chǎn)品的曲線中Soleris快速檢出時(shí)間與含菌量存在較好的負(fù)相關(guān)的關(guān)系，即含菌量越多，檢出時(shí)間越早。當(dāng)產(chǎn)品中含菌量大于標(biāo)準(zhǔn)25CFU/g時(shí)，系統(tǒng)在22h左右報(bào)警。由圖2可見(jiàn)，Soleris快速法檢測(cè)肽藻營(yíng)養(yǎng)粉產(chǎn)品的曲線中Soleris快速檢出的曲線跟陽(yáng)性曲線一致，且檢出時(shí)間與含菌量存在較好的負(fù)相關(guān)的關(guān)系，即含菌量越多，檢出時(shí)間越早。對(duì)肽藻營(yíng)養(yǎng)粉而言，當(dāng)產(chǎn)品中含菌量大于標(biāo)準(zhǔn)25CFU/g時(shí)，系統(tǒng)在20h左右報(bào)警。由圖3可見(jiàn)，Soleris快速法檢測(cè)活力多產(chǎn)品的曲線中Soleris快速檢出的曲線跟陽(yáng)性曲線一致，同樣其檢出時(shí)間與含菌量存在較好的負(fù)相關(guān)的關(guān)系，即含菌量越多，檢出時(shí)間越早。對(duì)活力多而言，當(dāng)產(chǎn)品中含菌量大于標(biāo)準(zhǔn)25CFU/g時(shí)，系統(tǒng)在20h左右報(bào)警。快速檢測(cè)及其自動(dòng)化綜合引用微生物學(xué)、化學(xué)、分子生物學(xué)等試驗(yàn)技術(shù)對(duì)微生物進(jìn)行分離、檢測(cè)。和傳統(tǒng)方法比較，更快、更方便、更靈敏，可以同時(shí)得到定量的檢測(cè)結(jié)果。因此Soleris系統(tǒng)既可以適應(yīng)國(guó)內(nèi)食品檢測(cè)的特定要求，又能為企業(yè)的快速放貨提供信心保證[5]。完美公司遵從質(zhì)量第一原則從滿(mǎn)足消費(fèi)者對(duì)食品安全與生命健康的迫切要求出發(fā)，將新型檢測(cè)技術(shù)與傳統(tǒng)檢測(cè)相結(jié)合，給予產(chǎn)品質(zhì)量雙重保障，對(duì)存在微生物風(fēng)險(xiǎn)的產(chǎn)品能夠在30h內(nèi)發(fā)出警報(bào)，縮短了分析不合格的原因，減少了不合格品的產(chǎn)生，提高了過(guò)程監(jiān)控反應(yīng)速度，利于產(chǎn)品的質(zhì)量控制與生產(chǎn)控制，既是對(duì)自己嚴(yán)格要求，也是對(duì)消費(fèi)者負(fù)責(zé)任的體現(xiàn)。

　　參考文獻(xiàn)

　　[1]唐靈，郭奕芳，吳翊等.Petrifilm紙片法和國(guó)際法檢測(cè)奶制品細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)的結(jié)果比較[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2000，10（3）：325-327.

　　[2]吳清平，周艷紅，蔡芷荷.衛(wèi)生微生物特異性顯色培養(yǎng)基的研究與應(yīng)用[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2005，15（1）：124-126.

　　[3]熊強(qiáng)，史純珍，劉釗.食品微生物快速檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展.食品與械[J].2009，9（25）

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