目前韌菌性痢疾的栩菌檢出率還不能十分滿意,考慮其原因與送檢的時機(jī)和標(biāo)本的采取方法,培養(yǎng)基質(zhì)量及檢墩技術(shù)水平有關(guān),其中選擇良好的培養(yǎng)基尤屬重要。我院檢墩科曾接受了某部兩年內(nèi)有痢疾、踢炎病史者763名和180名炊事具的帶菌檢查,將所取標(biāo)本同時接種于去氧膽酸角構(gòu)撇酸鹽培養(yǎng)基與中國藍(lán)薔薇酸平板培養(yǎng)從上;以后又用于痢疾病人例行培養(yǎng)檢馭中,為了墩靚兩種培養(yǎng)基的實用價值,現(xiàn)將查料總拮如下:
材料與方法
一、標(biāo)本來源:
1.二年內(nèi)有痢疾病史者595名,均行乙狀枯踢鏡檢查,取其踢鉆液。
2.二年內(nèi)有踢炎病史者168名,均行乙狀桔踢鏡檢查,取其踢鉆液。
3.無病史炊事具180名,取其新解糞便。
4.抽取58例糞便培養(yǎng)陽性之住院慢性痢疾病具之糞便。用兩種培養(yǎng)基同時共接種1001人份標(biāo)本,
二、實墩材料:
1.去氧膽酸鈉構(gòu)撇酸鹽培養(yǎng)基7:取牛肉膏3克、蛋白膝10克、瓊脂25克溶于1000毫升蒸溜水中,稠整PH至7.4,行高壓15磅20分鐘滅菌。然后再加乳糖10克、構(gòu)撇酸角(Na3e‘H,q·ZH:o)20.6克、去氧膽酸鈉(EMerek)5克、拘撒酸鐵按2克、0.35%氛化鉛水溶液1毫升,水浴煮沸溶化后,加入1%中性杠水溶液3毫升,待涼至45OC左右傾注平板,儲存冰箱內(nèi)3一5口用完。
2.中國藍(lán)薔薇酸瓊脂平板培養(yǎng)基及糖發(fā)酵管均按謝氏‘所用方法制成。
3.宋內(nèi)氏痢疾桿菌靜斷血清(北京生物制品研究所制品),志賀氏,弗萊氏和史密氏靜斷血清(廣西防疫站制品)。
三、獻(xiàn)墩方法:凡有腹瀉史者均在乙狀
枯踢艦觀察下用無菌棉棒刮取腸壁上毅液并立即涂抹培養(yǎng)基面積的五分之一,然后用粕金耳均勻劃技涂開,使其滿布整個平板。糞便標(biāo)本8lJ取新鮮帶有血液私液部分接種于兩種培養(yǎng)基上,在37OC孵育24小時后,分別挑選可疑菌落2一3個移種于半固體三糖管中,孵育24小時后若呈致病菌反應(yīng),繼拔進(jìn)行完整的生化反應(yīng),最后取菌株與其相應(yīng)的靜斷血清行凝集獻(xiàn)駭。
結(jié)果
一、同時使用去氧膽酸角與中國藍(lán)兩種培養(yǎng)基對痢疾桿菌檢出枯果的比較:在1001份標(biāo)本中共分離出痢疾桿菌106株,陽性率為10.6%,其中只在去氧膽酸角瓊脂平板培養(yǎng)基檢出者43株,占總檢出數(shù)的40.5%,只于中國藍(lán)瓊脂平板培養(yǎng)基檢出者13株,占12.3%,同時在兩種培養(yǎng)基上檢出者50株,占47.2%。粽上所述,在去氧膽酸角培養(yǎng)基所檢出者共93株,陽性檢出率為9.29%。而在中國藍(lán)培養(yǎng)基上檢出者共63株,陽性檢出率為6.29%。羨明去氧膽酸劫培養(yǎng)基對痢疾桿菌的陽性檢出率比中國藍(lán)培養(yǎng)基高3.0%,但亦有中國藍(lán)培養(yǎng)基陽性而去氧膽酸勃培養(yǎng)基陰性者,這靛明此兩種培養(yǎng)基均有一定缺陷。
二、檢查對象不同與培養(yǎng)基檢出桔果的行痢疾桿菌培養(yǎng)最好同時使用,以彌補(bǔ)互相關(guān)系:不足之處。不同檢查對象與栩菌檢出枯果如表一:
不對象的本在去氧膽角培養(yǎng)基中在1001標(biāo)本中離疾桿菌106株藍(lán)培養(yǎng)基檢出率之比:有痢疾病史者的踢鉆其中以弗茉氏痢疾桿菌最多,靛90株,占檢出液為1.42:1,有踢炎病史者為3:1,炊事具菌株的84.9%,宋內(nèi)氏桿菌9株,占檢出菌為1.75:1,痢疾病具糞便為1.40:1。株的8.49%,志賀氏桿菌4株,占檢出菌株
三、兩種培養(yǎng)基檢出桔果與痢疾桿菌菌的3.8%,史密氏桿菌3株,占檢出菌株的型的關(guān)系:2.81%(表二)。
在去氧膽酸潮培養(yǎng)基上生長弗萊氏桿菌此次受檢對象艷大部分系帶菌者,其中80株,占弗萊氏桿菌總數(shù)的88.9%,宋內(nèi)氏包括有痢疾、踢炎病史者的踢鉆液763份,桿菌8株,志賀氏桿菌3株,史密氏桿菌2檢出痢疾桿菌40株,炊事具糞便180份,檢株,可兌弗萊氏桿菌和宋內(nèi)氏桿菌在去氧膽出痢疾桿菌8株;同時抽取了58名痢疾病具酸角培養(yǎng)基上檢出較中國藍(lán)培養(yǎng)基為多。糞便培養(yǎng)陽性標(biāo)本,茲就標(biāo)本性狀與二種培
四、標(biāo)本性狀與培養(yǎng)基檢出枯果的關(guān)系:養(yǎng)基檢出桔果關(guān)系兌表三:
去氧膽酸鈉與中國藍(lán)培養(yǎng)基之踢鉆液檢出率的比例為1.6:1,一炊事具正常糞便之比為1.75:1,痢疾病具黃色成形糞便之比為1.62:1,黃色稀狀有鉆液糞便之比為2:1,濃血二種培養(yǎng)基檢出率相仿。襯確用于培養(yǎng)痢疾桿菌的培養(yǎng)基較多,作者等同時用了去氧膽酸角與中國藍(lán)兩種培養(yǎng)基進(jìn)行了943份帶菌標(biāo)本稠查,并且抽查了58例痢疾病具陽性標(biāo)本,總共檢出痢疾桿菌106株,占受檢人數(shù)的10.6%,其中用去氧膽酸鈉培養(yǎng)基分離出93株,為檢出菌株中的87.7%,而用中國藍(lán)培養(yǎng)基分離出63株,為檢出菌株的59.4%,較時氏等‘報告的改良去氧膽酸鈉培養(yǎng)基的陽性率65.9%為高,這可能是本培養(yǎng)基能抑制相當(dāng)量的大踢桿菌生長,以致實際操作中標(biāo)本接種量較多,有利于痢疾桿菌生長所致,但用此培養(yǎng)基培養(yǎng)仍有12.3%的痢疾桿菌被遣漏,由此敲明如Seiffert氏4、中谷氏啥、zJ、島氏弓、r,只·CHHa。和O·r.BHPrePas氏等主張每份標(biāo)本同時接種含有膽鹽和另一種不含膽鹽性培養(yǎng)基能提高痢疾桿菌的陽性率的意兌。
去氧膽酸鈉培養(yǎng)基對帶菌者和慢性痢疾檢查,更有明顯意義(表三),有腹瀉病史者的踢鉆液及炊事員正常糞便陽性率較中國藍(lán)培養(yǎng)基高出75%,尤其是慢性痢疾的黃色稀形、無血有鉆液糞便的檢出率竟高出1倍,這可能因為這些受檢對象排菌機(jī)會較少,糞便中的大踢捍菌較多,故適于用膽鹽選擇性培養(yǎng)基,以增加接種標(biāo)本量,抑制非致病菌生長,有利于痢疾捍菌的分離。
關(guān)于去氧膽酸鈉培養(yǎng)基對各型痢疾桿菌生長影響,文獻(xiàn)中提到對志賀氏、宋內(nèi)氏痢疾桿菌有一定抑制作用,表二指出,弗萊氏菌生長良好,宋內(nèi)氏菌亦然,但對志賀氏菌和史密氏菌生長似有一定抑制作用,雖然此次分離的菌株太少,不便作桔榆,但也反映了文獻(xiàn)中提到的查料的一般面貌。有些學(xué)者認(rèn)為應(yīng)用中國藍(lán)薔薇酸培養(yǎng)基分離痢疾桿菌較其它選擇性培養(yǎng)基優(yōu)越。本文檢出的106株痢疾桿菌中59.4%是用中國藍(lán)培養(yǎng)基分離出的,尤其是其中有13株是去氧膽酸角培養(yǎng)基培養(yǎng)陰性者,但是由于本培養(yǎng)基對大踢捍菌、變形捍菌抑制作用很小故每次不能接種校多量標(biāo)本,而且培養(yǎng)基的錳別作用主要靠菌落的顏色反應(yīng)及形狀,當(dāng)培養(yǎng)基內(nèi)非致病菌生長較多或密集時,即可使整個培養(yǎng)基變成藍(lán)色,以致影響對病原菌菌落的緩別。
總結(jié)
本文概述了用去氧膽酸角培養(yǎng)基與中國藍(lán)培養(yǎng)基同時檢查763名有痢疾、腸炎病史者的踢粘液、180名炊事具糞便及58名慢性痢疾病具糞便培養(yǎng)陽性標(biāo)本,分離山痢疾桿菌106株,陽性檢出率為10.6%,內(nèi)有93株系用去氧膽酸鈉培養(yǎng)基分離出的,占檢出菌株數(shù)的87.7%,而63株系用中國藍(lán)培養(yǎng)基分離出者,占檢出菌株的59.4%。
檢出的106株痢疾桿菌中,弗萊氏桿菌90株,宋內(nèi)氏桿菌9株,志賀氏桿菌4株,史密氏桿菌3株,這些菌型檢出與培養(yǎng)基關(guān)系是,弗萊氏痢菌在去氧膽酸角培養(yǎng)基上分離出80株,宋內(nèi)氏痢菌分離出8株,志賀氏痢菌3株,史密氏痢菌2株。
不同檢查對象的標(biāo)本性狀與培養(yǎng)叢關(guān)系,去氧膽酸鈉對帶菌者檢出陽性率較中國藍(lán)培養(yǎng)基高出60%左右,對慢性痢疾病只黃色固形糞便和稀狀鉆液便栩菌檢出率高出近一倍。
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